細胞株をよりシンプルかつ効率的に

1.適切な細胞株の選択
実験に適切な細胞株を選択するときは、次の基準を考慮してください。
a.種: 非ヒトおよび非霊長類の細胞株には通常、生物学的安全性に関する制限がほとんどありませんが、最終的には特定の種の培養物を使用するかどうかは実験によって決定されます。
b.特徴: 実験の目的は何ですか?たとえば、肝臓や腎臓に由来する細胞株は毒性試験により適している可能性があります。
c.限定的または連続的:限定された細胞株から選択すると、正しい機能を発現するためのより多くのオプションが提供される可能性がありますが、一般に連続的細胞株の方がクローニングと維持が容易です。
d.正常または形質転換：形質転換細胞株は通常、より高い増殖速度とより高い播種効率を持ち、継続的であり、培地中の血清の必要量が少なくなりますが、その表現型は遺伝子形質転換によって永続的な変化を受けています。
e. 増殖条件と特性: 増殖速度、飽和密度、クローニング効率、懸濁液増殖能力についての要件は何ですか?たとえば、組換えタンパク質を高収率で発現させるには、増殖速度が速く、懸濁液中で増殖できる細胞株を選択する必要がある場合があります。
f.その他の基準: 使用している細胞株が限られている場合、利用可能な在庫は十分ですか?細胞株は完全に特徴付けられていますか? それとも自分で検証する必要がありますか?異常な細胞株を使用している場合、対照として使用できる同等の正常な細胞株はありますか?細胞株は安定していますか?そうでない場合、それをクローンして、実験に十分な量の冷凍ストックを生成するのはどのくらい簡単ですか?

2.細胞株の取得
初代細胞から独自の培養物を構築することも、商業または非営利の供給者 (つまり細胞バンク) から確立された細胞培養物を購入することもできます。信頼できるサプライヤーは、完全性について慎重にテストされ、培養物に汚染物質が含まれていないことを確認した高品質の細胞株を提供します。細胞培養物が汚染されるリスクが高いため、他の研究室から培養物を借用しないことをお勧めします。発生源に関係なく、すべての新しい細胞株がマイコプラズマ汚染について検査されていることを使用を開始する前に確認してください。